1、输液系统
输液系统一般由储液器及脱气装置、高压输液泵、梯度洗脱装置构成,其功能是给分离系统提供稳定的能将}昆合组分分离的高压液体。
(1)储液器:储液器一般是玻璃或聚四氟乙烯衬里的塑料容器,容积0.5~2L。有时也用500mL溶剂瓶。流动相中会溶解空气(水更明显),含有微粒杂质,因此流动相在转入储液器前必须过滤和脱气。制备好的流动相一般是先过滤后脱气。对于拥有在线脱气装置的仪器只需要过滤就可以正常工作。过滤器采用全玻璃系统,依据色谱柱内径和填料颗粒细度选用0.22μm或0.45μm水系或有机系的微孔滤膜进行过滤。置于储液器底部的输液导管,需要安装孔径lOμm的不锈钢质或铝质或聚四氟乙烯材料的过滤头,该过滤头要定期(不宜超过7d)清洗,特别是在水相中的,使之保持通畅,避免输液管路内产生气泡。流动相脱气是非常重要的,若气泡吸人高压泵液缸,会导致压力不稳或停止输液。
(2)脱气装置:在高效液相色谱仪工作期间,每天或每时每刻都要对流动相进行脱气。脱气有3种处理方式。
①超声波振荡脱气加真空脱气法(5min+5min):将储液器置于清洗用超声波振荡5min,然后再用微型真空泵或循环水式真空泵进行脱气5min。有文献报道,将上述两种方法联合使用脱气效果最佳。在充装流动相的密闭容器中,抽真空使溶解气体从流动相中逸出的方法不适合按比例混合好的流动相脱气,因为长时间的抽真空会改变流动相的配比,可能会使组分的保留时间发生明显的变化。另外,使用该方法脱气的流动相只能满足高压梯度洗脱。
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